1.真菌直接检查取痰、脓、尿、支气管灌洗液、皮损刮取物等标本加10%KOH直接镜检，见大的圆形厚壁孢子出芽，芽颈宽，具诊断意义。应注意与组织中不典型的巴西副球孢子菌、杜波依斯组织胞浆菌、新生隐球菌相鉴别。

2.真菌培养标本至少培养4周。室温培养见白色羊毛状菌落，镜检见小分生孢子圆形侧生于分生孢子梗上，极具感染性。37℃培养为孢子相。两型可相互转换。外抗原试验可快速(24小时)鉴定。

3.组织病理无论局限性或播散性芽生菌病都引起混合性化脓性肉芽肿性反应，依感染部位和时间不同，可能以一种反应为主。巨细胞内或脓肿内有厚壁、出单芽的大孢子，直径8～15μm，芽劲宽，与直接镜检所见相同，具特征性，有诊断意义。