针刺对 D - gal 致衰老模型大鼠脑、肝组织SOD、MDA 影响的实验研究

探索衰老机制、寻求延缓衰老的方法一直是医学研究的一个热点。在针灸抗衰老穴位临床应用和实验研究方面，现已达到了分子水平，为针灸抗衰老的临床应用和实验研究奠定了一定的基础。然而在实验研究方面，对于抗衰老穴位特异性的研究却甚少。基于此，笔者通过对比研究常用的抗衰老穴位对脑、肝组织中超氧化物歧化酶( SOD) 活性、丙二醛( MDA) 含量的影响，以探讨抗衰老穴位是否存在特异性。

1 材料与方法

1. 1 实验动物及分组 健康 Wistar 大鼠 40 只，雌雄各半，体质量( 300 ± 50) g，购自黑龙江中医药大学实验动物中心，动物合格证为 SCXK( 京) 2007 - 0001。全部实验动物均予常规饮水和相同饲料分笼饲养，室温保持 22℃，湿度 40%，空气新鲜，通风良好。所有大鼠随机分为 4 组，每组 10 只，即正常组、模型组、督穴组、体穴组。

1. 2 试剂与仪器 超氧化物歧化酶( SOD) 、丙二醛( MDA) 、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒( 南京建成生物工程研究所) ; AL204 电子天平、PL602 - S 电子天平( 上海梅特勒 - 托利多仪器有限公司) ; 75MM 组织碾容器( 涿州市长虹玻璃仪器厂) ; KD - 160HR 高速冷冻离心机( 科大创新股份有限公司中佳分公司) ; 722型光栅分光光度计( 山东高密分析仪器厂) ; DHG -9140A 型电热恒温鼓风干燥箱( 上海一恒科技有限公司) ; KQ -800 KDE 超声波清洗器( 昆山市超声仪器有限公司) ; HSS -1( B) 数字式超级恒温欲槽( 成都仪器厂) ; XMTB 数显调节仪( 北京市长风仪器仪表公司) ;恒温冰箱( 青岛海尔有限公司) 。

1. 3 衰老动物模型的制备 采用 D - 半乳糖致亚急性衰老法[1]，将 D - 半乳糖 50g 于 500ml 生理盐水中，按注射剂量 100mg/kg/d 予大鼠腹腔内注射，造膜时间为 8 周，每周称其体质量 1 次，依据末次称取的大鼠体质量克数调整给药剂量，从而建立衰老大鼠模型。

1. 4 针刺方法 督穴组选取督脉腧穴百会、大椎穴;

体穴组选取抗衰老常用穴关元、足三里穴。各组大鼠 均用特制的大鼠固定板固定后分别处理，针刺各组大鼠采用 0. 30mm ×40mm 毫针针刺，“百会”穴向后平刺3mm、“大椎”穴直刺进针 5mm、“关元”穴直刺或向上平刺 2mm、双侧“足三里”穴直刺进针 5mm，间歇 5min捻转1 次，平补平泻，每日1 次，时间30min。10 天为1疗程，间歇 1 天。正常组和模型组大鼠不进行针刺，但亦经过抓取、固定等过程。第 8 周结束后进行指标测定。 1. 5 观测指标

第 8 周实验结束后，断颈处死各组动物。准确称取脑、肝组织质量，按质量体积比加生理盐水制备成 10% 的组织匀浆，备用。SOD、MDA 测试操作过程严格按照试剂盒说明书进行。

1. 6 统计学处理 实验数据采用 SPSS 13. 0 统计软件进行处理，结果以均数 ± 标准差( x珋 ± s) 表示，组间比较采用单因素方差分析( AVONA) 。

2 实验结果

2. 1 针刺对衰老大鼠脑、肝组织 SOD 活力影响的比较 结果见表 1。表 1 针刺对衰老大鼠脑、肝组织 SOD 活力影响(x珋 ± s)组别 nSOD( U / mgprot)脑组织 肝组织正常组 10 278.99 ±38. 97*211. 46 ± 37. 56*模型组 10 91.96 ±17. 17 89.44 ±18.91

督穴组 10 174.22 ±11. 04*△135. 49 ± 13. 59*△体穴组 10 145.96 ±20. 10

*△134. 63 ± 13. 97*△注: 与模型组比较，*P < 0. 01; 与正常组比较，△P < 0. 01。表1 结果显示，造模后模型组大鼠脑、肝组织 SOD的活力明显下降，与正常组比较具有显著性差异( P